Development of an extended OECD One-Generation Reproduction Test with Zebrafish (ZEOGRT) for the identification of endocrine disruptors : final report / by Dr. Matthias Teigeler, Dr. Kornelija Franzen, Dr. Elke Eilebrecht, Prof. Dr. Christoph Schäfers (Fraunhofer Institute for Molecular biology and Applied Ecology IME, Schmallenberg, Germany) ; on behalf of the German Environment Agency ; edited by: Section Coordination Group Ecotoxicology and Bioaccumulation of Division IV Chemical Safety - Susanne Walter-Rohde, Dr. Gerd Maack (Fachbegleitung)
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Discovery
1965189261
URN
urn:nbn:de:gbv:3:2-123456789-1178664
DOI
ISBN
ISSN
Beiträger
Körperschaft
Erschienen
Dessau-Roßlau : Umweltbundesamt, 2026
Umfang
1 Online-Ressource (263 Seiten, 14,41 MB) : Illustrationen
Ausgabevermerk
Sprache
eng
Anmerkungen
Report completed in: August 2025
Literaturverzeichnis: Seite 234-236
Sprache der Zusammenfassung: Englisch, Deutsch
Inhaltliche Zusammenfassung
This report summarizes the validation of the Zebrafish extended one generation reproduction test (ZEOGRT). The test design covers a one-generation test approach including an adult parental reproduction phase (F0), a full filial 1 generation (F1), and the hatching period of a second filial generation (F2). The test aims to detect potential endocrine acting substances by assessing both impact on population relevant endpoints as well as effects on physiological parameters like biomarker concentrations. Histological and histopathological examination can be added to obtain information on the specific mode of action. The test procedure is flexible to cover estrogenic, androgenic modes of action and allows to include further assessments on e.g. gene expression or thyroid endpoints. However, the implementation of these parameters was not part of the validation. Project 2.59: New Test Guideline on Zebrafish Extended One Generation Reproduction Test (ZEOGRT) was included on the test guidelines workplan by the Working Group of National Coordinators for the OECD Test Guidelines Programme (WNT) in April 2016. This report presents the results from phase I and phase II of the validation. For phase I, in total four ZEOGRT studies were performed at the Fraunhofer Institute for Molecular Biology and Applied Ecology IME, Germany between 2018 and 2020. In these studies, zebrafish were exposed to an estrogen receptor antagonist, an aromatase inhibitor, a synthetic progestin and a glucocorticoid. Within this report, the intra-laboratory variability was assessed. Furthermore, the effect concentrations derived were compared with available data from the literature. For the second part of the validation process (phase II), which examines inter-laboratory variability, it was possible to identify two laboratories that contributed with own studies. Finally, three additional studies were added to the data pool. To extend the data set, additional control mean values for the different biological parameters were collected from available industry studies to allow a calculation and evaluation of control variability. Phase I of the project confirmed the applicability of the protocol, and the results obtained showed consistency with available effect data from the literature. Phase II confirmed the successful transfer of the protocol to the international laboratories Within an expert meeting held at the German environment agency (UBA) in June 2024, available results were discussed. Moreover, the discussion included modifications of the test protocol, the development of suitable pre-test strategies and strategies how to implement the new test guideline in the regulatory context.
Dieser Bericht fasst die Ergebnisse eines Validierungsprojekts für einen verlängerten Ein-Generationen Reproduktionstests mit Zebrabärblingen (ZEOGRT) zusammen. Der Testaufbau beinhaltet einen Ein-Generationen Ansatz und deckt eine parentale Reproduktionsphase mit adulten Fischen ab (F0) sowie eine vollständige Filial 1 Generation (F1) und schließlich die Schlupfphase einer zweiten Filialgeneration (F2). Ziel des Tests ist die Untersuchung und Identifikation von potenziell hormonaktiven Substanzen, indem sowohl populationsrelevante Endpunkte als auch Effekte auf physiologische Parameter wie etwa spezifische Biomarker erfasst werden. Histologische und histopathologische Analysen können hinzugefügt werden, um den zugrunde liegenden Wirkmechanismus zu identifizieren. Die Testprozedur ist geeignet, um potenziell östrogene und androgene Wirkmechanismen zu detektieren, erlaubt aber darüber hinaus weitere Untersuchungen einzubinden, wie etwa Genexpressionsmessungen sowie die Analyse Schilddrüsen-gesteuerter Parameter. Allerdings waren diese Methodiken nicht Bestandteil des Validierungsprozesses. Das Project 2.59: New Test Guideline on Zebrafish Extended One Generation Reproduction Test (ZEOGRT) wurde im April 2016 in den Arbeitsplan der Arbeitsgruppe der Nationalen Koordinatoren für das OECD-Prüfrichtlinienprogramm (WNT) aufgenommen. Dieser Bericht präsentiert die Ergebnisse der zwei Validierungsphasen (I und II). Im Rahmen von Phase I wurden zwischen 2018 und 2020 insgesamt vier ZEOGRT Studien am Fraunhofer Institut für Molekularbiologie und Angewandte Oekologie IME durchgeführt. In diesen Studien wurden Zebrabärblinge mit insgesamt vier Substanzen exponiert, die verschiedene Wirkmechanismen repräsentierten: ein Östrogenrezeptor Antagonist, ein Aromatasehemmer, ein synthetisches Progestin sowie einem Glukokortikoid. In diesem Bericht wurde auf Basis der Ergebnisse die Intra-Labor Variabilität untersucht. Darüber hinaus wurden die ermittelten Effektkonzentrationen mit verfügbaren Daten aus der wissenschaftlichen Literatur verglichen. Im zweiten Teil der Validierung (Phase II) wurde in Zusammenarbeit mit externen Laboren eine Vergleichsstudie durchgeführt, um auch hier Daten zur Variabilität der Daten zu generieren. Insgesamt konnten zwei Labore identifiziert werden, die insgesamt drei weitere ZEOGRT Studien durchführten. Um den Datensatz zu erweitern, wurden aus verfügbaren Industriestudien, die nach dem ZEOGRT Protokoll durchgeführt wurden, die Mittelwerte der Kontrolldaten gesammelt und der Datenauswertung zugeführt. Die Ergebnisse aus Phase I des Projekts belegten die Anwendbarkeit des Protokolls. Zudem zeigten die ermittelten Effektkonzentrationen gute Übereinstimmung mit den Literaturdaten. Phase II belegte den erfolgreichen Transfer und die Anwendbarkeit des Protokolls auch in den internationalen Laboren. Im Rahmen eines Fachgesprächs am Umweltbundesamt in Dessau-Roßlau im Juni 2024 wurden verfügbare Ergebnisse präsentiert und zur Diskussion gestellt. Das Fachgespräch behandelte mögliche Modifikationen des ZEOGRT-Versuchsplans, aber auch die Entwicklung geeigneter Vorteststrategien sowie die Einbindung der neuen Richtlinie in die bestehende regulatorische Bewertung hormonaktiver Substanzen.
Schriftenreihe
Texte. Umweltbundesamt ; 2026, 16 ppn:505871920
REFOPLAN of the Federal Ministry for the Environment, Climate Action, Nature Conservation and Nuclear Safety
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